La detección molecular se ha convertido en una herramienta esencial en el diagnóstico veterinario, permite la identificación temprana y precisa de enfermedades en animales.

Entre las tecnologías más utilizadas están la PCR en tiempo real y la PCR isotérmica.

Aunque ambas buscan detectar material genético de los patógenos, sus metodologías, ventajas y aplicaciones varían significativamente.

En este artículo, compararemos estas técnicas para ayudarte a decidir cuál es más adecuada para tus necesidades.

¿Qué es la PCR en Tiempo Real?

La PCR en tiempo real (qPCR) amplifica el ADN o ARN del patógeno en ciclos de calentamiento y enfriamiento controlados.

Este método utiliza un termociclador que mide la amplificación del material genético en tiempo real, permitiendo una cuantificación precisa.

• ¿Cómo funciona?
  • Una muestra del animal (hisopado, sangre, tejido) se procesa para extraer el material genético.
  • Se realizan ciclos de temperatura para amplificar el ADN o ARN en un termociclador.
  • La detección se realiza con tintes fluorescentes que miden la cantidad de material amplificado a lo largo del proceso.
• Tiempo de resultados: 1 a 3 horas, dependiendo del equipo.

Ventajas de la PCR en tiempo real:

• Alta sensibilidad y especificidad: Detecta incluso cantidades mínimas de material genético.
• Cuantificación precisa: Útil para medir la carga viral o bacteriana.
• Versatilidad: Puede detectar múltiples patógenos en una sola reacción (multiplex).

Limitaciones:

• Requiere equipos especializados y un laboratorio.
• Es más costosa en comparación con métodos isotérmicos.
• Mayor tiempo de configuración y análisis.

Usos comunes:

• Diagnóstico de infecciones graves como el parvovirus canino o la brucelosis bovina.
• Estudios de investigación y epidemiología en animales.

¿Qué es la PCR Isotérmica?

La PCR isotérmica es una técnica de amplificación molecular que no requiere ciclos de calentamiento y enfriamiento.

En cambio, la amplificación ocurre a una temperatura constante, gracias a enzimas especializadas.

• ¿Cómo funciona?
  • Una muestra del animal se procesa para extraer el material genético.
  • La reacción ocurre en un rango de temperatura constante (usualmente 60-65°C).
  • Los resultados pueden observarse visualmente (cambio de color) o con equipos básicos.

Ventajas de la PCR isotérmica:

• Rápida: Proporciona resultados en 10-30 minutos.
• Portátil: Ideal para clínicas veterinarias y uso en campo.
• Económica: No requiere un termociclador avanzado.
• Fácil de usar: Menos compleja que la qPCR.

Limitaciones:

• Sensibilidad y especificidad ligeramente inferiores a la qPCR.
• No permite cuantificar la carga del patógeno.

Usos comunes:

• Diagnóstico rápido de enfermedades infecciosas en el campo, como la gripe aviar en aves o la diarrea viral bovina.
• Control de brotes en granjas.

Comparación: PCR en Tiempo Real vs PCR Isotérmica

¿Cuál es mejor para ti?

La elección entre PCR en tiempo real y PCR isotérmica depende de tus necesidades:

1. Elige PCR en Tiempo Real si:

   • Necesitas la máxima precisión y sensibilidad.
   • Trabajas en un laboratorio con acceso a equipos avanzados.
   • Quieres medir la carga viral o bacteriana del patógeno.
   • Realizas estudios detallados de múltiples patógenos.

2. Elige PCR Isotérmica si:

   • Necesitas rapidez y simplicidad en el diagnóstico.
   • Trabajas en el campo o en una clínica con recursos limitados.
   • Buscas una opción económica para detección puntual de enfermedades.
   • Requieres una solución portátil para situaciones de emergencia.

Conclusión

Ambas tecnologías son herramientas poderosas en el diagnóstico veterinario. La PCR en tiempo real es ideal para diagnósticos complejos y estudios detallados en laboratorio, mientras que la PCR isotérmica destaca por su rapidez, portabilidad y facilidad de uso en el campo.

En muchos casos, estas técnicas se complementan: la isotérmica para detección inicial y la qPCR para confirmación y análisis detallado. 

¡Un diagnóstico acertado es clave para cuidar la salud de los animales!